研究問題:胚胎卵裂球和透明帶在玻璃化冷凍過程中偶爾會受損,這是否是由於冷凍載
體受到外力彎曲導致抗凍劑在玻璃化狀態下出現裂縫並引發機械性損傷所致?
實驗設計:使用309個來自異常受精卵的分裂期胚胎來評估在不同冷凍載體彎曲程度下
的胚胎損傷。將已放置胚胎的冷凍載體放入液態氮後給予外力使其前彎或後彎,並分成
三種彎曲程度及同時搭配三種不同的胚胎放置位置來探討彎曲程度和胚胎受損之間的
相關性,並透過顯微鏡觀察由外力彎曲引起的抗凍劑裂縫,以及解凍後胚胎的卵裂球溶
解率、受損率和存活率來評估胚胎受損狀況。
結果:經外力彎曲的冷凍載體上的抗凍劑出現了許多平行裂縫,這導致了胚胎卵裂球的
損傷(圖一)。與前彎和對照組相比,後彎更容易損傷胚胎,這從顯著更高的卵裂球溶解
率和胚胎受損率以及更低的胚胎存活率中得到證實。(表一)(P<0.001)。隨著彎曲程度的
增加,胚胎損傷程度也增加(表二)。胚胎放置位置與胚胎損傷程度相關(表三)。
結論:冷凍載體在受到外力彎曲時會使抗凍劑產生裂縫導致胚胎損傷,並且與彎曲方
向、彎曲程度及胚胎放置位置有關,為了防止此類損傷,玻璃化冷凍時應避免彎曲到冷
凍載體,並將胚胎放置在冷凍載體靠近前端的位置。