目前,選擇整倍體胚胎最有效的方法是胚胎著床前染色體篩檢 (PGT-A),此項技 術需要從胚胎中切取部分細胞進行分析。在過去,在胚胎分裂期階段的便進行採樣, 但由於分裂期的胚胎鑲嵌發生率高,容易增加誤診風險增加,另外採檢細胞數量占總 體細胞數的比例高(例如在 8 細胞胚胎取樣一個細胞分析,便等同取樣細胞占整體的 12.5%),導致後續臨床懷孕率低。隨著培養技術的進步,現今進行胚胎切片都需培養 至囊胚期,僅切取部分滋養層細胞進行分析,此階段的胚胎細胞數較多,診斷的準確 率較高切片後也較不易影響後續胚胎著床。 作者改良了傳統分裂期的切片方式並應用到囊胚時期,詳細過程如下列所述: 1) 先用雷射助孵性系統在囊胚透明帶上打開一個小洞。 2) 通過洞口注入培養液以擴大囊胚和透明帶之間的縫隙(perivitelline space ,PVS)。 3) 再用雷射助孵性系統在囊胚透明帶上將洞口擴大。 4) 過程中持續從開口注入培養液。 5) 滋養層細胞便從透明帶開口被推出來。 6) 摘取所需的細胞便完成切片
和傳統切片方法相比,新的切片技術(n-Ext )除了在操作上多花了些時間外,在摘取細胞數、切完後存活率以及後續用 NGS 分析結果的部份來看,並沒有顯著性的差異
打開一個小洞口的使胚胎孵化出來,若是在第三天(Day3)/第四天(Day4) 打洞會增加 內細胞團(ICM cell) 孵化的風險;若是第五天(Day5)/第六天(Day6) 打洞則需要等待 胚胎孵化時間,意味著需要多次拿出培養箱觀查,增加暴露環境的風險。但使用新的 切片技術(n-Ext )方法則可以應用任何時期的囊胚且可以不需面臨上述風險,並可縮 短 2~3 小時的操作時間
(文章出處:A novel trophectoderm biopsy technique for all blastocyst stages)